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技術(shù)文章

ELISA實驗之空白孔的設(shè)置

點擊次數(shù)：14867   發(fā)布時間：2021/3/4 10:04:51

天上海恒遠(yuǎn)為大家講解ELISA實驗技巧中的空白孔對照。

elisa試劑盒ELISA空白對照有幾種：
1. 空氣空白水空白：般是用于儀器調(diào)零的,所有孔數(shù)值減掉該孔數(shù)值。
2.底物空白：般是用于防止底物弱顯色所造成的讀數(shù)偏高，同樣所有孔數(shù)值減掉該孔數(shù)值（只加底物和終止液）
3. 酶空白：般在2步法實驗中使用，主要是看酶是否和板有非特異性結(jié)合的，般不做這個 。
 
ELISA空白孔般設(shè)個，這是為了減除顯色液的OD值。而陰性和陽性標(biāo)準(zhǔn)品比較好是設(shè)2個復(fù)孔，雖然有點浪費，但為了確保實驗的可靠性，我認(rèn)為還是很有必要的。ELISA空白孔加什么？般兩個做法，看個人習(xí)慣或者說看你們實驗室的習(xí)慣：

 
1，什么都不加，然后那個孔按照操作流程來做，這個說法的根據(jù)就是空白，也就是什么都沒有。
2，加樣本稀釋液，然后按照操作流程來做。這個做法的根據(jù)就是只要不含陽性物質(zhì)就算是空白的，加入樣本稀釋液的目的是為了使這個孔除了在沒有陽性物質(zhì)上其他的都與其他孔致。
怎麼控制顯色時間？
顯色時間要通過預(yù)實驗找到所測所有sample的顯色OD在0.1到2.0的有效range間，我用過OPD solution，般incubation for 15min at RT，測次然后立即加入s solution 在測次。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司

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