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ELISA試劑盒、人ELISA試劑盒、大鼠ELISA試劑盒、小鼠ELISA試劑盒、生物試劑、抗體、血清、進口標準品、微生物培養基
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技術文章

小鼠瓜氨酸化組蛋白H3(CH3)ELISA試劑盒使用說明書

點擊次數:14190   發布時間:2024/1/9 15:17:06

本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍:                                                             96T

3pg/ml-150pg/ml   

使用目的:

本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中瓜氨酸化組蛋白H3(CH3)含量

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本小鼠瓜氨酸化組蛋白H3(CH3)水平。用純化的小鼠瓜氨酸化組蛋白H3(CH3)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入瓜氨酸化組蛋白H3(CH3)再與HRP標記的瓜氨酸化組蛋白H3(CH3)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過che底洗滌后底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的瓜氨酸化組蛋白H3(CH3)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品小鼠瓜氨酸化組蛋白H3(CH3)濃度。

操作步驟

1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

120pg/ml

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

60pg/ml

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

30pg/ml

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

15pg/ml

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

7.5pg/ml

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

 

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘   

4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外

7. 溫育:操作同3

8. 洗滌:操作同5

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

10. 終止:每孔加終止50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)

11. 測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值) 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

 

保存條件及有效期

1試劑盒保存:2-8

2.有效期:6個月

 

原創作者:上海恒遠生物技術發展有限公司

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